1.Que é o cultivo celular?
O cultivo celular refírese á eliminación de células de animais ou plantas e despois cultivalas nun ambiente artificial favorable.As células pódense extraer directamente do tecido e descompoñerse por medios enzimáticos ou mecánicos antes do cultivo, ou poden derivarse de liñas celulares ou liñas celulares establecidas.
2.Que é a cultura primaria?
O cultivo primario refírese á fase de cultivo despois de que as células se separan do tecido e proliferan en condicións adecuadas ata que ocupan todos os substratos dispoñibles (é dicir, chegan á confluencia).Nesta fase, as células deben ser subcultivadas trasladándoas a un novo recipiente con medio de crecemento fresco para proporcionar máis espazo para o crecemento continuado.
2.1 Liña celular
Despois do primeiro subcultivo, o cultivo primario chámase liña celular ou subclon.As liñas celulares derivadas de cultivos primarios teñen unha vida útil limitada (é dicir, son limitadas; ver máis abaixo), e a medida que pasan, dominan as células con maior capacidade de crecemento, dando como resultado un certo grao de xenotipo na poboación consistente co fenotipo.
2.2 Cepa celular
Se unha subpoboación dunha liña celular se selecciona positivamente do cultivo mediante clonación ou algún outro método, a liña celular converteríase nunha cepa celular.As cepas celulares adoitan adquirir cambios xenéticos adicionais despois de que comeza a liña parental.
3.Liñas celulares limitadas e continuas
As células normais adoitan dividirse só un número limitado de veces antes de perder a capacidade de proliferar.Este é un evento determinado xeneticamente chamado senescencia;estas liñas celulares chámanse liñas celulares finitas.Porén, algunhas liñas celulares vólvense inmortais mediante un proceso chamado transformación, que pode ocorrer de forma espontánea ou pode ser inducida por produtos químicos ou virus.Cando unha liña celular finita sofre transformación e adquire a capacidade de dividirse indefinidamente, convértese nunha liña celular continua.
4.Condición da cultura
As condicións de cultivo de cada tipo de célula son moi diferentes, pero o ambiente artificial para o cultivo de células sempre está composto por un recipiente axeitado, que contén o seguinte:
4.1 Substrato ou medio de cultivo que proporciona nutrientes esenciais (aminoácidos, carbohidratos, vitaminas, minerais)
4.2 Factores de crecemento
4.3 Hormonas
4.4 Gases (O2, CO2)
4.5 Medio físico e químico regulado (pH, presión osmótica, temperatura)
A maioría das células dependen do ancoraxe e deben cultivarse nun substrato sólido ou semisólido (cultivo adherente ou monocapa), mentres que outras células poden crecer flotando no medio (cultivo en suspensión).
5.Criopreservación
Se hai exceso de células no subcultivo, deben tratarse cun axente protector adecuado (como DMSO ou glicerol) e almacenarse a unha temperatura inferior a -130 °C (criopreservación) ata que sexan necesarias.Para máis información sobre o subcultivo e a criopreservación de células.
6.Morfoloxía das células en cultivo
As células en cultivo pódense dividir en tres categorías básicas en función da súa forma e aparencia (é dicir, morfoloxía).
6.1 Os fibroblastos as células son bipolares ou multipolares, teñen forma alongada e medran pegadas ao substrato.
6.2 As células epiteliais son poligonais, teñen un tamaño máis regular e están unidas á matriz en follas discretas.
6.3 As células semellantes aos linfoblastos son esféricas e adoitan crecer en suspensión sen unirse á superficie.
7.Aplicación do cultivo celular
O cultivo celular é unha das principais ferramentas empregadas na bioloxía celular e molecular.Proporciona un excelente sistema modelo para estudar a fisioloxía normal e a bioquímica das células (como a investigación metabólica, o envellecemento), os efectos de drogas e compostos tóxicos nas células, así como a mutaxénese e os efectos canceríxenos.Tamén se usa para a detección e desenvolvemento de fármacos e para a fabricación a gran escala de compostos biolóxicos (como vacinas, proteínas terapéuticas).A principal vantaxe de utilizar o cultivo celular para calquera destas aplicacións é a consistencia e reproducibilidade dos resultados que se poden obter mediante un lote de células clonadas.
Hora de publicación: 03-06-2019