1.Escoller a liña celular correcta
Ao escoller a liña celular adecuada para o seu experimento, teña en conta os seguintes criterios:
a.Especie: as liñas celulares non humanas e non de primates adoitan ter menos restricións de bioseguridade, pero ao final o teu experimento determinará se debes usar un cultivo dunha determinada especie.
b.Características: cal é o propósito do teu experimento?Por exemplo, as liñas celulares derivadas do fígado e do ril poden ser máis adecuadas para as probas de toxicidade.
c.Limitada ou continua: aínda que escoller entre unha liña celular limitada pode proporcionarche máis opcións para expresar a función correcta, as liñas celulares continuas son xeralmente máis fáciles de clonar e manter.
d.Normal ou transformada: as liñas celulares transformadas adoitan ter unha maior taxa de crecemento e unha maior eficiencia de sementeira, son continuas e requiren menos soro no medio de cultivo, pero o seu fenotipo sufriu cambios permanentes por medio da transformación xenética.
e.Condicións e características de crecemento: Cales son os seus requisitos para a velocidade de crecemento, a densidade de saturación, a eficiencia da clonación e a capacidade de crecemento da suspensión?Por exemplo, para expresar proteínas recombinantes con altos rendementos, é posible que necesite seleccionar liñas celulares que teñan taxas de crecemento rápidas e a capacidade de crecer en suspensión.
f.Outros criterios: se está a usar unha liña móbil limitada, hai stock suficiente dispoñible?A liña celular está totalmente caracterizada ou tes que verificala ti mesmo?Se está a usar unha liña celular anormal, existe unha liña celular normal equivalente que se poida usar como control?A liña celular é estable?Se non é así, qué tan fácil é clonalo e xerar stock conxelado suficiente para o teu experimento?
2.Obter liñas celulares
Podes construír o teu propio cultivo a partir de células primarias ou podes optar por mercar cultivos celulares establecidos a provedores comerciais ou sen ánimo de lucro (é dicir, bancos de células).Os provedores de renome proporcionan liñas celulares de alta calidade que foron coidadosamente probadas para a súa integridade e aseguran que o cultivo está libre de contaminantes.Recomendamos non tomar en préstamo cultivos doutros laboratorios porque teñen un alto risco de contaminación de cultivos celulares.Independentemente da súa orixe, asegúrese de que todas as liñas celulares novas foron probadas para detectar a contaminación por micoplasma antes de comezar a usalo.
Hora de publicación: 01-feb-2023